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评估经皮冠状动脉球囊置入后冠状动脉粥样硬化性心脏病患者缺血修饰白蛋白检测的方法

 发布者:ZhangYNRR  发布时间:2009年11月17日 
 
来源:《中国组织工程研究与临床康复》杂志

△《中国组织工程研究与临床康复》杂志2009年第22期发表的苏州大学附属第一医院检验科作者黄惠芳的文章“经皮冠状动脉球囊置入后冠状动脉粥样硬化性心脏病患者缺血修饰白蛋白的检测及意义”,探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病患者经皮冠状动脉球囊置入后冠状动脉粥样硬化性心脏病患者缺血修饰白蛋白的水平变化及其临床意义。
△实验中的操作方法:
第一步:实验采用酶联荧光分析技术,样本进入包含被碱性磷酸酶标记的抗肌钙蛋白T抗体的孔中。样本/结合进出固相包被针(SPR)循环多次,是抗原和SPR内部墙结合的免疫球蛋白捆绑,形成结合三明治。最终酶催化底物(磷酸4-甲基伞形酮)水解为荧光物质(4-甲基伞形酮),荧光在450 nm被测量,荧光的强度和样本中抗原浓度呈正比。
第二步:利用白蛋白结合钴试验间接测定缺血修饰白蛋白,它是根据缺血修饰白蛋白结合金属Co2+能力减弱的性质进行测定。正常白蛋白以活性形式存在,加入钴试剂后,Co2+与白蛋白N-末端结合,溶液中存在的游离Co2+浓度较低;而心肌缺血还在血清标本中含有较多的缺血修饰白蛋白,加入同样量的钴试剂后,由于缺血修饰白蛋白与Co2+的结合能力降低,溶液中存在较高浓度的游离Co2+,加入二硫苏糖醇试剂后可与游离Co2+产生颜色反应,用全自动生化仪OLYMPUS AU2700测定吸光度,计算含量。
△作者认为:急性心肌缺血是引起急性冠状动脉综合征的最常见的机制,时间延长会导致心肌严重损伤和细胞死亡,因此评估急性冠状动脉综合征患者的心肌缺血需在细胞死亡之前做出。最近研究发现缺血修饰白蛋白诊断心肌缺血的敏感性很高,能在心肌缺血早期可逆阶段被检出,有助于心肌肌钙蛋白T阴性及心电图正常胸痛患者心肌缺血的排除诊断。
△提供值得他人借鉴的特点:通过观察冠心病患者经皮冠状动脉介入治疗球囊扩张造成的短暂心肌急性缺血后缺血修饰白蛋白、心肌肌钙蛋白T的动态变化并与60例健康人群进行比较,发现缺血修饰白蛋白是心肌缺血发生后到发生细胞坏死前一个非常早期的指标。在急性冠状动脉综合征的早期诊断、危险分层、指导治疗及预后等方面提供了工具,具有较大的临床意义。

 

 

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