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聚乳酸-聚羟基乙酸膜体外复合兔脂肪源性间充质细胞的生长规律

 发布者:LuoYLXSB  发布时间:2009年12月26日 
 
来源:CRTER

聚乳酸-聚羟基乙酸膜体外复合兔脂肪源性间充质细胞的生长规律

△    《中国组织工程研究与临床康复》(CRTER)杂志2009年51期发表的旦大学附属眼耳鼻喉科医院作者洪佳旭的文章“聚乳酸-聚羟基乙酸膜体外复合兔脂肪源性间充质细胞的生长规律”文章中,观察兔脂肪源性间充质细胞在聚乳酸-聚羟基乙酸膜上的黏附及生长情况。

△    实验中的操作方法

第一步:作者于2007-09/2009-03在复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科研究所和上海组织工程重点实验室将6月龄雌性新西兰大白兔6只用于提取脂肪源性间充质细胞。聚乳酸及聚羟基乙酸购自美国Sigma公司。兔麻醉后取颈背处的皮下脂肪,I型胶原酶消化法获得原代细胞,接种至含体积分数为10%胎牛血清的DMEM培养液中,细胞达80%融合时传代,取第4代细胞用于实验。将聚乳酸与聚羟基乙酸按照7∶3的比例合成聚乳酸-聚羟基乙酸膜,相对分子质量为104 900。

第二步:用Dio染料标记第4代细胞后测定不同接种浓度细胞在聚乳酸-聚羟基乙酸膜上的黏附率;在细胞与材料共培养1周以后,分别利用荧光倒置显微镜、扫描电镜及双光子显微镜观察细胞在材料表面及内部的生长情况。

第三步:结论为脂肪源性间充质细胞可在聚乳酸-聚羟基乙酸膜材料表面及内部生长,两者生物相容性较好。

△    作者认为,本操作方法区有别于常规方法的特点:

目前国际上有报道脂肪干细胞与聚乳酸-聚羟基乙酸微粒生物相容性的研究,但对临床上常用的聚乳酸-聚羟基乙酸膜研究较少。本实验拟明确体外培养脂肪干细胞与聚乳酸-聚羟基乙酸膜的的生物相容性,为进一步应用研究奠定基础。

如果能够增加体外培养细胞的三向分化实验,并通过体内实验明确该复合物与机体的相容性,将进一步完善实验结果。

 

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