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微囊化兔许旺细胞移植脊髓损伤大鼠:碱性成纤维细胞生长因子表达和后肢运动功能的变化

 发布者:LuoYLXSB  发布时间:2010年2月11日 
 
来源:CRTER

△    《中国组织工程研究与临床康复》(CRTER)杂志2010年3期发表的南昌大学医学院作者陈惠的文章“微囊化兔许旺细胞移植脊髓损伤大鼠:碱性成纤维细胞生长因子表达和后肢运动功能的变化”文章中,观察微囊化兔许旺细胞移植于损伤大鼠脊髓后,碱性成纤维细胞生长因子的表达以及后肢运动功能的恢复。

△    实验中的操作方法

第一步:于2008-11/2009-09在九江学院医学院医学科研中心将健康成年SD大鼠80只,体质量(250±30) g,雌雄不限,随机分为正常组5只、细胞组25只、空囊组25只、微囊组25只。另取健康成年家兔8只,体质量(2 800±200) g,用于制备许旺细胞。

第二步:取家兔坐骨神经以双酶消化法制成许旺细胞悬液后,再用气体喷入法制成海藻酸钡-许旺细胞微囊。同法制备不包被许旺细胞的空囊。SD大鼠随机分为4组:细胞组、空囊组、微囊组建立脊髓半横断损伤模型,分别于损伤处植入明胶海绵吸附的10 μL许旺细胞悬液、10 μL空囊、10 μL海藻酸钡-许旺细胞微囊;正常组不做任何干预。采用BBB评分观察大鼠后肢运动功能恢复情况,制作脊髓标本切片通过苏木精-伊红染色和尼氏染色行病理学检查,免疫组织化学染色观察碱性成纤维细胞生长因子的表达变化。

第三步:造模后即刻大鼠右后肢出现瘫痪;材料移植后7,14,28 d,微囊组大鼠后肢运动功能明显恢复,BBB评分明显优于细胞组、空囊组(P < 0.05或P < 0.01)。碱性成纤维细胞生长因子阳性细胞主要见于神经元细胞的胞浆及胶质细胞的胞核内。材料移植后第1,3,7天,胶质细胞主要在脊髓损伤附近处表达,其中第3天表达量最大;第14天在神经元细胞的胞浆内可见碱性成纤维细胞生长因子表达,微囊组表达程度明显高于细胞组、空囊组;之后各组表达程度均明显下降。提示微囊化兔许旺细胞移植于损伤大鼠脊髓后,可以抑制异种移植后免疫排斥,减轻炎症反应,增加碱性成纤维细胞生长因子表达,促进后肢功能恢复和脊髓再生。

△    作者认为,本操作方法区有别于常规方法的特点:

①实验结果证实微囊化兔许旺细胞移植于大鼠损伤脊髓后可以抑制异种移植后免疫排斥反应,减轻炎症反应,增加碱性成纤维细胞生长因子的表达,比单纯移植异种许旺细胞治疗脊髓损伤效果更好,进一步探讨脊髓损伤修复的机制,为临床治疗脊髓损伤提供实验资料。

②课题设计对时间点的选择欠周到,材料移植后第14天与第28天的间隔过长,不利于详细追踪观察指标。

 

 

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