研究表明，低频脉冲超声能促进全层关节软骨缺损修复，延缓实验性早期骨关节炎的病变进展。水通道蛋白3存在于关节软骨及滑膜上，并在骨关节炎的发病机制中发挥重要作用。探讨低频脉冲超声对实验性膝骨关节炎兔关节软骨及滑膜水通道蛋白3表达的影响。

    预实验：取5只白兔，左膝关节用管型石膏固定于伸直位制动6周，取股骨内髁及胫骨平台软骨和滑膜组织进行苏木精-伊红染色，可见软骨细胞有增生，排列不规则，部分软骨表面有裂隙、破坏、变薄，部分纤维化，软骨及滑膜有炎症细胞浸润，滑膜增生。符合骨关节炎的病理表现，说明造模成功。

    实验分组、造模与干预：将36只兔左膝关节用管型石膏固定于伸直位制动6周制备实验性兔膝关节骨关节炎模型。将造模成功的36只兔随机分为2组，每组18只。实验组予以低频脉冲超声治疗(频率为1 MHz，功率为2.0 W)，1次/d，15 min/次，直至实验结束；对照组不接受超声治疗，但操作过程同实验组，只是超声治疗仪不开机，探头无能量输出，整个治疗过程中不制动。

    低频脉冲超声治疗方法：治疗前均以镇静剂量(5%~10%的麻醉剂量)的戊巴比妥钠肌肉注射，待治疗兔活动量明显减少时开始治疗。治疗由2人负责：1人按扶实验兔，1人持超声治疗头治疗。将成年新西兰兔左后膝关节局部脱毛，治疗时将治疗仪的探头紧贴兔膝关节关节间隙部位皮肤，探头和皮肤之间涂以超声耦合剂，治疗过程中不移动探头的位置。对照组膝关节相同部位皮肤涂以超声耦合剂，将治疗仪的探头紧贴该处，进行不开功率源的假治疗。在治疗期间定期将兔左后肢脱毛，以免兔毛影响超声波穿入组织内。

    免疫组织化学染色：分别于治疗后2，4，8周，每组取6只兔麻醉处死，取股骨内髁及胫骨平台软骨和滑膜组织进行免疫组化检测。标本固定后，行3 μm厚组织切片，二甲苯脱蜡，梯度乙醇水化，微波修复抗原5 min，温度：95~100 ℃。体积分数3%过氧化氢处理10 min以抑制内源性过氧化物酶活性，正常羊血清孵育15 min封闭抗原以减少非特异性背景，滴加一抗，4 ℃过夜。生物素化二抗孵育20 min，链霉亲和素生物素过氧化物酶复合物孵育20 min。DAB显色，自来水冲洗终止反应。苏木精复染，脱水，透明，封固。用磷酸盐缓冲液代替一抗作为阴性对照。每组选取10张制作优良的水通道蛋白3免疫组织化学染色切片，每张切片随机选取10个高倍视野进行图像分析，各组所选取部位相同。采用北航CM-2000型生物医学图像分析系统测定其染色的平均灰度值。

    结果与结论：随着造模后时间的延长，各组兔关节软骨及滑膜水通道蛋白3的表达均有所增加；与对照组比较，实验组兔关节软骨及滑膜水通道蛋白3表达明显降低(P < 0.01)。说明低频脉冲超声能降低实验性兔膝骨关节炎关节软骨及滑膜水通道蛋白3的表达，从而缓解关节肿胀，延缓软骨及滑膜的退变，具有软骨及滑膜保护作用。

    更多内容请见《中国组织工程研究与临床康复》杂志第15卷2011年第11期 

    唐进，黄良库，彭李华，李东，陈世荣. 低频脉冲超声干预膝骨关节炎模型兔关节软骨及滑膜水通道蛋白3的表达[J].中国组织工程研究与临床康复，2011，15(11):1941-1944.