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兔VX2肌肉肿瘤模型的建立及生物学特性
发布者:LiYLWZB 发布时间:2011年7月27日 来源:CRTER |
兔VX2肿瘤细胞株可接种在兔的肝、肾、骨及脑等部位制成肿瘤模型,但是接种于肌肉内建立的肿瘤模型很少用于实验研究。建立兔VX2肌肉肿瘤模型并观察其生物学特性。
肿瘤模型的建立与分组:将带有VX2肿瘤的荷瘤种兔肌注麻醉(速眠新0.1 mL/kg)后,仰卧位固定,对肿瘤部位皮肤进行剃毛、消毒、放置无菌洞巾、手术切开皮肤,剥离肿瘤,用双面刀片切取肿瘤边缘生长旺盛的淡红色鱼肉样组织,将其切成1 mm×1 mm×1 mm大小的组织块后,置于低温的RPMI1640液中备用。33只新西兰大白兔经100 g/L硫化钠一侧大腿近段外侧脱毛,速眠新0.1 mL/kg肌肉注射麻醉后,俯卧位固定于手术台上。常规手术区消毒、放置无菌洞巾后,采用切口瘤块包埋种植法,于兔一侧大腿股外侧肌处作一1 cm长切口,然后依次切开皮下组织,筋膜,暴露股外侧肌,用眼科镊在肌肉层穿一小洞,将一瘤块植于其中,然后依次缝合肌肉、筋膜、皮下组织和皮肤层,该软组织肿瘤模型兔即制作完毕。
观察及处理方法:①随机取15只荷瘤兔,分别在接种后7,10,14,21,28 d行B超检查,对肿瘤的形态、大小、内部回声等进行监测记录。肿瘤体积按Carlsson公式[5]:V=0.5×a×b2(其中a和b分别是B超测量的瘤体长径和厚径,V为肿瘤体积)计算;肿瘤生长率(tumor growth rate.TGR)根据公式TGR=(a2b2 -a1b1)/a1b1×100%计算[6];行彩色多普勒血流成像检查,观察其在上述各天肿瘤血供分布、血流动力学情况;记录荷瘤兔自然死亡时间,死亡时有无转移及转移部位,荷瘤兔自然生存时间以接种之日至自然死亡时计算,根据死亡后解剖结果推测荷瘤动物死亡原因。②另18只分别于肿瘤接种后10,15,20,25,30,35 d随机处死3只荷瘤兔,取肿瘤组织用40 g/L甲醛溶液固定48 h以上,石蜡包埋、连续5μm切片、苏木精-伊红染色,在光学显微镜下观察VX2肌肉软组织移植性肿瘤组织学特性;解剖记录肿瘤有无转移及转移部位,对有转移灶的组织器官取材,进行病理学检查证实。实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。
结果与结论:33只兔均进入结果分析。①建立的兔VX2肌肉肿瘤模型成瘤率高达100%,接种7~10 d,肿瘤生长迅速,生长率为55.9%;接种10~14 d,肿瘤生长减缓,生长率为68.6%;14 d以后,肿瘤再次迅速增长。②B超示21 d后肿瘤内部可见形状不规则,大小不等的小片状无回声区(9/15,60%)或高回声钙化区(4/15,26.7%);彩色多普勒血流成像肿瘤边缘血供丰富。③病理组织学可见肿瘤细胞呈巢状或条索状弥漫分布,瘤细胞体积较大,形态不规则,有较多核分裂相,细胞异型性大。④肿瘤移植后25 d开始出现肺转移,其他部位均无转移。
此模型移植成功率高,建模时间短且肿瘤生长迅速,肿瘤血供丰富,转移发生较晚,且只发生肺转移,无其他部位转移,该模型是一种较为理想的用于研究肿瘤局部治疗对肺转移影响的动物模型。
更多内容请见《中国组织工程研究与临床康复》杂志第12卷2008年第11期
苏静,陈文直,王嫣,刘丽萍,龚晓波,王智彪. 兔VX2肌肉肿瘤模型的建立及生物学特性[J].中国组织工程研究与临床康复,2008,12(11):2129-2132
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