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如何利用微芯片内细胞培养提高细胞间相互作用?
发布者:LiWWZXB 发布时间:2011年12月20日 来源:[来源] 注入芯片内培养的细胞采用实验室常规培养的3T3细胞和B.Cap细胞(上海市第九人民医院组织工程中心)。细胞培养液为DMEM(Gibco),加入l0%的胎牛血清(杭州四季青生物工程材料有限公司)的链青霉素(吉诺生物医药技术有限公司,杭州),消化液为0.25%的胰酶和0.02%的EDTA(吉诺生物医药技术有限公司,杭州)。
将制作好的细胞培养微芯片用75%的酒精浸润.然后放人常规细胞培养皿(P0lystyr%e Petri dish)中,用紫外线照射l h,进行消毒。为利于细胞在微通道内贴壁生长,在微通道内导人细胞培养液浸润过夜,使芯片表面包被蛋白。将生长状态良好的细胞进行消化,吹散打匀,通过进液孔导人芯片内,放入培养箱内进行培养。培养过程中每隔一天更换芯片内部的培养液。
培养箱外培养时,将导人细胞的芯片放在玻璃加热平台上,同时在培养基内添加与DMEM等量的Leibovitz’s L—15(Gibco)以保证细胞外基质的酸碱度稳定,并且每12 h补充一次培养液,以保证培养基的稳定。
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