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构建人EPO基因真核表达载体转染人脐血间充质干细胞后能否在体外可获得稳定的表达?
发布者:LiWWZXB 发布时间:2012年1月20日 来源:crter EPO是一种新的、作用很强的神经营养因子,不仅可促进神经前体细胞的增殖和分化,减少神经细胞的凋亡;而且能促进血管内皮细胞的成熟和存活,使血管再生,减轻局部缺氧造成的损害。 脑内的EPO和EPO受体的表达受低氧诱导因子的调控,在缺氧缺血条件下,EPO尤其是EPO受体表达明显增加,因此外源的EPO具有很好的治疗缺氧缺血性脑损伤的作用. 然而EPO仅有极少量透过血脑屏障,并且半衰期短,只有大剂量、多次静脉注射才能取到一定的治疗效果,但大剂量静脉注射易出现红细胞增多,多次注射有导致纯红再障的风险,而脑内注射尤其是多次脑内注射在临床上是行不通的. 将EPO基因通过移植细胞导入脑内,使其在脑内持续表达,就可以发挥EPO的神经营养和神经保护作用,此即为EPO的基因治疗. 而且脑内的EPO不进入血循环,不会出现红细胞增多和纯红再障等不良反应。 选择人EPO基因和人脐血MSCs作为靶基因和靶细胞,将人EPO基因转染人脐血MSCs,获得稳定转染人EPO基因的人脐血MSCs,以期作为一种基因修饰干细胞用于移植治疗重度新生儿HIE,起到EPO基因治疗和MSCs细胞治疗相结合的双重作用. 本实验成功构建出了EPO基因真核表达载体,转染人脐血MSCs后经稳定筛选获得了能稳定表达EPO的人脐血MSCs,为EPO基因修饰的人脐血MSCs用于移植治疗重度新生儿HIE奠定了实验基础,同时因为EPO是一种具有促红细胞生成作用的造血因子,人脐血MSCs尚具有支持造血的功能,因此EPO基因修饰的人脐血MSCs还可用于临床上各种贫血的治疗,对于探索治疗贫血的新方法也具有重要的实用价值。 快速投稿及咨询电邮:crter04@crter.org
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