采用每150μL 5.5x106个的高细胞密度，使得细胞间距交小，细胞间黏附力增大，同时，光滑的琼脂糖极大地减小了聚集自由能，为纤维软骨细胞自组装基体的形成创造了必要条件。

细胞接种到琼脂糖井内的最初几天，由于组装成的基体较为疏松，换液时应尽量避免晃动培养板以防基体碎裂。本实验利用自组装技术构建的纤维软骨基体，在外观、组织学和组织化学上与自然关节盘组织相似。I型胶原和GAGs是TMJ关节盘组织较为特异的标志性成分，免疫组织化学检测显示自组装基体内广泛分布有I型胶原成分，Safranin—O／fastgreen染色也表明白组装基体内关节盘细胞分泌少量细胞外基质GAGs。无支架琼脂糖凝胶三维培养系统为细胞间信息的交流和自分泌生长因子的聚集提供便利，维系关节盘纤维软骨细胞的表型。

自组装基体在细胞接种后的第1周出现明显的外形收缩现象。有人认为这种收缩可能与体外培养的纤维软骨中ot一平滑肌肌动蛋白缸一曷Ⅱ啪tll muscle actin，ot-SMA)的表达增多有关，表达a—SMA的纤维软骨细胞会引起细胞外基质收缩、变形，对工程化纤维软骨构建产生不利影响嗍。研究提示碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)和星孢菌素可抑制软骨细胞中d—SMA表达。

另外，有研究对影响自组装基体生长的外环境因素包括生长因子和生物力学刺激的效应进行了研究。血小板衍生生长因子、bFGF和转化生长因子一B1对接种到二维生长物与聚乙醇酸表面的关节盘细胞的代谢有一定的影响，对细胞增殖、胶原合成和复合物的力学性能具有上调效应和协同效应M切。在体外细胞培养中，静水压、直接压缩力、剪切流环境等机械刺激都是纤维软骨细胞生存和不断生成细胞外基质的手段，尽管采用琼脂糖凝胶三维自组装模型为研究机械刺激对工程化组织的作用提供了便利，但是，干预基体生长的最佳因素目前还不明确。

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